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            > 全轉錄組范圍同時獲取RNA豐度及活性RNA聚合酶位點的方法及試劑盒

            全轉錄組范圍同時獲取RNA豐度及活性RNA聚合酶位點的方法及試劑盒

            806   編輯:管理員   來源:中冶有色網  
            2023-03-19 08:14:37
            本發明提供一種全轉錄組范圍同時獲取RNA豐度及活性RNA聚合酶位點的方法及試劑盒。該方法基于活性RNA聚合酶可在體外將未修飾的三磷酸核苷、N6?烯丙基三磷酸腺苷(a6ATP)、N4?烯丙基三磷酸胞苷(a4CTP)轉錄進新生RNA中,經化學處理誘導使修飾堿基在逆轉錄成DNA過程中發生堿基突變,然后通過核酸測序手段識別突變位點,進而得到N6?烯丙基腺嘌呤(a6A)和N4?烯丙基胞嘧啶(a4C)位點,該位點即為活性RNA聚合酶原本所在的位點。未突變的部分即為原有的RNA,即可得到新生RNA的豐度。本發明首次實現了在隔離的染色質中進行a6A、a4C的特異性標記,能夠借助突變測序的手段進行定位,并利用一次測序獲取活性聚合酶位點與RNA豐度兩種信息。
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