一種高效表達與制備外分泌型人源CA125的方法,該方法主要包括如下三個方面的內容:(1)利用基因合成技術合成CA125的DNA序列,再采用基因克隆和分子生物學方法構建酵母重組表達質粒PpICZαA?CA125,并進行質粒抽提;(2)使用畢赤酵母表達系統體外誘導表達分泌型CA125重組蛋白,并通過優化表達時間、誘導劑添加量等條件得出最佳誘導條件;(3)優化硫酸銨分級沉淀, 從發酵液上清中分離純化得到分泌到胞外的CA125重組蛋白,在55%硫酸銨濃度下目的蛋白CA125幾乎全部析出,本發明將純化得到的分泌重組蛋白CA125用臨床檢測電化學發光法檢測其生物活性,其值達802100U/mL。
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