本發明屬于生物技術領域,具體公開了一種通用的糖蛋白N?糖鏈釋放方法包括將糖蛋白樣品溶于濃氨水中,在密閉容器中55?70℃水浴反應12?20h,得到的反應液減壓濃縮干燥,加水重新溶解,得到的N?糖鏈粗品溶液調節pH至中性,然后依次經過C18固相萃取柱和石墨碳固相萃取柱的純化,完成N?糖鏈的釋放和制備。該方法通用性強,與目前已有方法相比有以下優點:適用于中性N?糖鏈、酸性N?糖鏈和含有核心α?1,3?巖藻糖修飾的N?糖鏈;既能用于糖鏈的微量分析又能用于糖鏈的大規模制備;操作步驟簡單、快速,成本低廉,克服了傳統酶法和以前報道的化學法釋放糖蛋白N?糖鏈的缺陷;此方法得到的還原性N?糖即可以直接進行分析又可用于多種衍生化方法衍生化后分析。
聲明:
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我是此專利(論文)的發明人(作者)