本發明可二次驗證堿基信息的DNA測序方法涉及的是一種能夠原位清除延伸標記物,能夠二次驗證同一個堿基位置的信息,逐個堿基鑒定未知DNA序列。該技術過程如下:1)3′端硫代修飾的測序引物與被固定的待測DNA序列進行雜交;2)加入第一次延伸反應溶液,延伸四種熒光標記的核苷酸單體,通過檢測得到堿基信息;3)將2)中延伸上的核苷酸單體用酶進行切割清除;4)加入第二次延伸反應溶液,延伸熒光標記的可脫保護的硫代核苷酸單體,通過檢測再次得到堿基信息;5)用化學試劑去除4)中延伸上的硫代核苷酸單體上的可脫保護基團和熒光基團;循環上述2)、3)、4)和5)所進行的過程,直到確定待測DNA中的堿基序列信息。
聲明:
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