本發明公開了一種以葡萄糖氧化酶功能化的金納米粒子為探針的電致化學發光生物傳感器構建方法及其在蛋白質激酶活性檢測和抑制劑篩選中的應用,屬于電致化學發光領域。將生物素標記的DNA和GOx共軛修飾到AuNPs表面制備多功能納米探針GOx/AuNPs/DNA;在蛋白質激酶A和三磷酸腺苷的作用下,修飾于電極表面的多肽發生磷酸化,通過抗原-抗體的特異性識別作用,將生物素標記的抗磷酸化絲氨酸抗體結合到多肽的磷酸化位點上;再利用親和素對生物素反應的介導作用,將GOx/AuNPs/DNA捕獲到電極表面。蛋白質激酶A的濃度越大,多肽修飾電極表面產生的磷酸化位點越多,組裝于傳感界面的GOx就越多,GOx催化葡萄糖產生的H2O2越多,魯米諾的發光越強,實現了對蛋白質激酶A的高靈敏檢測。
聲明:
“多功能納米探針GOx/Au NPs/DNA的制備方法及其激酶檢測應用” 該技術專利(論文)所有權利歸屬于技術(論文)所有人。僅供學習研究,如用于商業用途,請聯系該技術所有人。
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