本發明公開了一種基于比色法或電化學法測定蛋白激酶PKA的活性的方法,該方法以單鏈DNA(dC12)為模板及穩定劑,通過NaBH4還原AgNO3合成銀納米簇(AgNCs);PKA催化水解ATP將γ磷酸根轉移到多肽底物的絲氨基酸上,利用Zr4+將磷酸化的多肽和AgNCs的模板DNA結合,構建分子探針;AgNCs作為晶種能夠促使銀染反應,生成銀納米顆粒使溶液由淺黃色變為黑色,多肽包裹AgNCs后抑制了銀染反應,溶液變色速度減慢;同樣AgNCs在電極表面會產生電信號,銀染反應大大增強了AgNCs的電信號,蛋白磷酸化抑制了銀染的發生,電信號減弱;利用該分子探針可以通過比色法或電化學法測定蛋白激酶PKA的活性,具有操作簡單、靈敏度高、且檢測用時短的優點。
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