本發明提供一種化學合成的H7N9禽流感病毒NA蛋白胞外區抗原片段及制備方法和應用,涉及基因工程技術領域。該方法通過生物信息學分析,篩選出H7N9禽流感病毒NA蛋白胞外區抗原片段,基于E.coli原核生物偏愛密碼子進行密碼子優化,化學合成抗原表位的全新基因序列;然后利用基因工程技術,構建具有編碼NA胞外區域的DNA表達載體,將該載體轉化到感受態細胞中,從而得到以包涵體形式表達的重組tN9;對該包涵體進行超聲處理得到重新折疊的重組tN9;通過SDS?PAGE收集并分析正確折疊的tN9,進行蛋白親和純化和質譜分析。本發明制備的重組蛋白可用于H7N9禽流感感染NA抗體的檢測及單抗和多抗制備,為深入探索NA的蛋白結構及功能、H7N9禽流感病毒致病機制和建立快速檢測方法奠定基礎。
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